Hoechst 33258是一種可以穿透細(xì)胞膜的熒光染料,對細(xì)胞的毒性較低,是特異性的DNA染料,與A-T鍵結(jié)合,這種染料對死細(xì)胞或經(jīng)固定的細(xì)胞可立即染色。而活細(xì)胞的著色是漸進(jìn)性的,在10min內(nèi)可達(dá)飽和。細(xì)胞發(fā)生凋亡時,染色質(zhì)會固縮。Hoechst 33258染色后,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞的細(xì)胞核呈正常的藍(lán)色,凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核會呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染,顏色有些發(fā)白。Hoechst 33258和雙鏈DNA結(jié)合后,最大激發(fā)波長為352nm,最大發(fā)射波長為461nm。